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发表于 2023-7-27 14:32:05 | 显示全部楼层 |阅读模式
治疗杜氏肌营养不良症 (DMD),这是一种严重的肌营养不良症。在患有 DMD 的患者中,编码抗肌营养不良蛋白的 mRNA 通常含有导致阅读框发生改变的突变51,从而在这些患者中产生无功能的蛋白质。一些 DMD 患者的肌营养不良蛋白基因验证)追踪 DSB 中 MRE11 的精确招募;和 BLESS(直接原位断裂标记、链霉亲和素富集和新一代测序),以及其改进版本 BLISS(原位断裂标记和测序), 全尺寸图像 虽然体外无细胞生化方法快速且传统,但与需

要将 Cas 核酸酶直接引入细胞以识别全基因组脱靶位点的亚洲手机号码列表纤维素方法相比,它们不可避免地捕获一些假脱靶位点。这些基于NGS的无偏方法大致分为四类:通过修复产物间接标记脱靶断裂(GUIDE-seq、HTGTS、IDLV capture、PolyA-seq、PEAC-seq)、通过DNA修复蛋白间接标记脱靶断裂(DISCOVER-seq)、原位未修复断裂末端直接标记(BLESS、BLISS)

单链DNA(CRO)间接标记脱靶位点s-seq)(表1 )。 GUIDE-seq 是最常用的方法,借助将线性双链寡脱氧核苷酸 (dsODN) 插入 CRISPR-Cas 脱靶位点44。dsODN 插入后,特定和 PolyA-seq 的灵敏度低于其他细胞方法,因为这些方法保留了随机整合到基因组中的较高能力;换句话说,IDLV 捕获、ITR-Seq 和 PolyA-seq 中发现的大多数整合都是 Cas 核酸酶诱导的 DSB 的全基




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